南京妈祖庙会自明代迄今，时兴时衰，绵延不绝。妈祖庙会主要集中在每年春季农历三月二十三日妈祖诞辰日前后，是流传于南京地区的重要民俗文化活动。因其融入了古都文化和民间文化的内涵，显示出与沿海等地妈祖宫庙活动不同的文化魅力。
南京及周边地区民间流传着“三月二十三，乌龟（赑屭）爬下关”的谚语。每年农历三月二十三日前后，民众齐集于下关，祭祀天妃，祈求平安，逐步演变为集文化商贸活动于一体的庙会。1899年后，南京对外开埠，妈祖庙会繁盛一时。后因战乱，庙会时断时续。
妈祖宫庙是妈祖庙会中不可缺少的一部分，其建筑风格和布局与其他宗教的庙宇不同，钟楼、鼓楼、戏台、梳妆楼、寝殿等都非常独特。
妈祖庙会中表演的民间艺术主要有高跷、大幡、中幡、宝辇、捉灯捉炉、接香会、大殿会、单双伞秧歌、飞叉、十不闲、清驾会、五虎打箱、庄寿八仙、鹤龄跷、宝鼎会、莲花落、太狮会、门幡、什锦杂耍、杂技争雄、百花斗艳、爬杆等，以及其他娱乐、歌舞、杂耍项目。许多文艺演出的道具、服装、剪纸、空竹、绳结、雕刻以及农副产品、手工艺品、常用农具、日用杂品的买卖交易活动贯穿其中，活动丰富多彩。
庙会期间要进行隆重的祭拜妈祖活动，主要内容有：妈祖庙谒祖进香、祈福三献礼大典、行迎神礼、行初献礼、行亚献礼、行终献礼、行送神礼等。
南京地区广大民众通过这一祭典活动平台，祭拜天妃以保佑全家平安，风调雨顺，五谷丰登，天下太平。同时通过民间文艺演出、手工制品、生活用品的买卖交换和各种祭典方式，营造出一种祈求幸福的美好意境。妈祖庙会不断地把民间文艺活动、民间商业活动推向新的0，使其成为最具有影响力的民间文化商业活动。
南京妈祖庙会对于弘扬妈祖民俗文化、丰富古都南京的文化内涵、加强海内外特别是海峡两岸文化交流和友好往来、建设和谐社会产生了积极影响。2005年，为纪念郑和下西洋600周年，南京市复建天妃宫。为保护非物质文化遗产，南京市文化局、旅游局和下关区政府在天妃宫竣工的翌年开始恢复举办妈祖庙会。妈祖庙会每年举办一次，受到社会各界的普遍欢迎。2007年，妈祖庙会被江苏省人民政府列入首批江苏省非物质文化遗产名录。